用兩種不同的熒光染料對直徑6um的聚苯乙烯微球進行染色,每種熒光有10種濃度,從而獲得多達100種不同熒光編碼的微球系列。
把針對不同待測物質(zhì)的抗體以共價交聯(lián)的方式結(jié)合到特定編碼微球上,達到每種熒光微球?qū)?yīng)一個檢測靶標(biāo)。
把不同檢測靶點的熒光編碼微球進行混合,每顆微球會作為一個獨立的反應(yīng)載體,然后分階段加入待測物、生物素標(biāo)記的抗體、熒光素標(biāo)記的藻紅蛋白進行反應(yīng)形成“三明治”夾心復(fù)合物。
基于流式原理,通過鞘液帶動染色的微球在液流路中逐個循序通過,儀器中紅色光源(635nm分類激光)測量微球內(nèi)的染料,并識別微球編碼和分析物種類,綠色光源(532nm報告激光)測量微球報告分子熒光強度,經(jīng)分析處理,將熒光信號轉(zhuǎn)化為定量濃度檢測結(jié)果。






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